Jasa Kalibrasi Spektrofotometer Tiga Raksa Archives | Jasa Kalibrasi KAN | Akreditasi KAN - Murah - Cepat

Pada kesempatan ini kita akan membahas alat/instrument yang berguna dalam pengujian sampel tertentu yang berorientasi pada pengukuran kepekatan warna, instrument tersebut adalah Spektrofotometer

Spektrofotometer adalah alat yang digunakan untuk mengukur absorbansi dengan cara melewatkan cahaya dengan panjang gelombang tertentu pada suatu obyek kaca atau kuarsa yang disebut kuvet. Sebagian dari cahaya tersebut akan diserap dan sisanya akan dilewatkan. Alat ini memiliki prinsip kerja hasil penggabungan dari alat spektrometer dan fotometer. Spektrometer adalah alat yang menghasilkan sinar dari spektrum dengan panjang gelombang tertentu. Sedangkan fotometer adalah alat pengukur intensitas cahaya yang ditransmisikan atau diabsorbsikan. Spektrometer memiliki alat pengurai seperti prisma yang dapat menyeleksi panjang gelombang dari sinar putih. Pada fotometer terdapat filter dari berbagai warna yang memiliki spesifikasi melewatkan trayek panjang gelombang tertentu.

Spektrofotometer merupakan suatu alat/instrument yang dilengkapi dengan sumber cahaya (gelombang elektromagnetik), baik cahaya UV (ultra-violet) atau pun cahaya nampak (visible). Spektrofotometer mampu membaca/mengukur kepekatan warna dari sampel tertentu dengan panjang gelombang tertentu pula. Alat ini digunakan untuk mengukur konsentrasi beberapa molekul seperti DNA/ RNA (UV light, 260 nm), protein (UV, 280 nm), kultur sel bakteri, ragi/ yeast (Vis light, 600 nm), dan lain-lain. Sinar UV digunakan untuk mengukur bahan (larutan) yang terbaca dengan panjang gelombang di bawah 400 nano meter (nm). Sedangkan visible light bisa digunakan untuk mengukur bahan dengan panjang gelombang 400-700 nm. Penyerapan sinar UV dan sinar tampak oleh molekul, melalui 3 proses yaitu penyerapan oleh transisi elektron ikatan dan elektron anti ikatan, penyerapan oleh transisi elektron d dan f dari molekul kompleks, dan penyerapan oleh perpindahan muatan.
Spektrofotometer dibagi menjadi dua jenis yaitu spektrofotometer single beam dan spektrofotometerdouble-beam. Perbedaan kedua jenis spektrofotometer ini hanya pada pemberian cahaya, dimana pada single-beam, cahaya hanya melewati satu arah sehingga nilai yang diperoleh hanya nilai absorbansi dari larutan yang dimasukan.

Berbeda dengan single-beam, pada spektrofotometer double-beam, nilai blanko dapat langsung diukur bersamaan dengan larutan yang diinginkan dalam satu kali proses yang sama. Suatu spektrofotometer tersusun dari sumber spektrum tampak yang kontinyu, monokromator, sel pengabsorbsi untuk larutan sampel atau blanko dan suatu alat untuk mengukur perbedaan absorbsi antara sampel dan blanko ataupun pembanding.

Berikut alur prinsip kerja dari suatu spektrofotometer :

Dalam bidang kimia, pengukuran analitik memiliki fungsi sangat pening, bertujuan untuk menentukan nilai sebenarnya dari sebuah parameter ukur kimia, semisal konsentrasi, pH, nilai absorbansi maupun transmittance serta pengukuran spektrofotometer UV-VIS. Selain itu tujuan dari kalibrasi yakni untuk mencapai ketertelusuran pengukuran. Pada Spektrofotometer UV-VIS sering digunakan dalam menentukan konsentrasi senyawa-senyawa yang dapat menyerap radiasi pada ultraviolet (200-400 nm) atau pada daerah sinar tampak (400-800 nm). Spektrofotometer merupakan gabungan dari alat optik dan alat elektronik serta sifat kimiafisik dimana detektor yang digunakan secara langsung dalam mengukur intensitas cahaya yang dipancarkan dan detektor yang digunakan secara tidak langsug dapat mengukur cahaya yang diabsorb. Setiap media akan menabsorb cahaya dengan panjang gelombang tertentu bergantung pada senyawa atau warna yang dibentuk. Instrumen ini menghasilkann cahaya dengan panjang gelombang terseleksi yang bersifat monokromatis, sementara fotometer memiliki peranan dalam mengukur intensitas berkas monokromatis. Berkaitan dengan proses kalibrasi pada spektrofotometer yang akan menjadi fokus kalibrasi adalah Absorbansi serta panjang gelombang.

Cara dan teknik Kalibrasi Panjang Gelombang pada Spektrofotometer :

Dengan menggunakan filterglass helium oksida yang memiliki panjang gelombang acuan yakni :

24,5 ± 0,2 333,7 ± 0,6 453,2 ± 1,4

279,4 ± 0,3 360,9 ± 0,8 536,2 ± 2,3

297,5 ± 0,4 418,4 ± 1,1 637,5 ± 3,8

Filterglas heliumoksida dipasang pada kompartemen sampel dan kompartemen pembanding yang dikosongkan
Lakukan scaning spectrum serapn heliumoksida
Selanjutnya bandingkan panjang gelombang spektrum yang diperoleh dengan data panjang gelombang acuan.

Cara dan Teknik Kalibrasi Absorbans pada Spektrofotometer :

Membuat larutan kalium dikromat 50 + 0,5 mg dalam 1 liter larutan asam sulfat 0,005 mol atau larutan A
Membuat larutan kalium dikromat 100 + 1 mg dalam 1 liter asam sulfat 0,005 mol/L atau larutan B. Membuat larutan assam sulfat 0,005 mol/L sebagai pembanding dan bandingkan hasilnya dengan data acuan (± 2 %)

Secara teknikal berbagai macam kendala yang akan di temui dalam penggunaan spektrofotometri dalam sebuah analisa, beberapa faktor tersebut yang menyebabkan kesalahan sistematik yang biasa terjadi dalam analisis menggunakan spektrofotometer seperti:

Adanya serapan pelarut
Serapan oleh kuvet
Kesalahan fotometrik normal pada pengukuran dengan absorbansi sangat rendah atau sangat tinggi.

Salah satu cara yang bisa diantisipasi adalah dengan melakukan pengaturan konsentrasi, sesuai dengan kisaran sensitivitas dari alat yang digunakan dengan pengenceran atau pemekatan. Itulah sedikit ulasan yang diambil dari berbagai sumber. Jika anda atau mungkin rekan anda membutuhkan Jasa Kalibrasi Spektrofotometer jangan segan-segan menghubungi kami. BMD Laboratory siap membantu anda dalam memberikan Jasa Kalibrasi terbaik.

Tag: Jasa Kalibrasi Spektrofotometer Tiga Raksa

Mengenal Spektofotometer

Teknik Kalibrasi Spektrofotometer UV-VIS

Alfiyah Muntazah

Ikhfa Agus Riyanti

Sulastri - Branch Yogya

Vriska

Siti Rofikoh